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NEWS甘油菌种复苏与保藏步骤 - ag尊龙凯时专属指南
来源:章妍君 日期:2025-02-22菌种保藏(culture preservation, culture collection)是保证微生物菌株活力及遗传特性的关键技术。在生物医学研究中,经过基因编辑或改造的菌种不仅珍贵且量少,因此必须进行妥善的保藏以确保其后续使用的可行性。以下是具体的操作步骤:
首先,将待保存的菌液与预配好的甘油混合液按照1:1的比例混合,最终达到20%的甘油浓度。同时,准备40%(v/v)甘油与灭菌水的混合液体。接着,取出2ml的离心管或保菌管,加入500微升的40%甘油-水混合液。使用移液枪吸取500微升的菌液,确保枪头深入液面以下缓缓加入。然后,将离心管或保菌管放置于-80℃冰箱中保存。务必在保菌管上标注保存日期、菌种名称及抗性信息,以便今后识别和使用。
复苏保存的菌液可以进行后续操作,主要步骤如下:取含有抗性的LB培养基,每个培养管加入约八毫升,确保所有操作均在无菌操作台下进行,以防污染。向每个培养管中加入100微升的菌液,在37℃下以180rpm摇动培养12小时。
氨苄抗性的制备方式为:将1g的氨苄青霉素钠溶解于10ml的灭菌水中,过滤后储存于-20℃。LB培养基的配置步骤为:将10g氯化钠、10g胰蛋白胨和5g酵母提取物溶解于1升体系中,再分装到250ml的锥形瓶中,每瓶100ml。
对于Amp抗性,可以在100ml的培养基中加入100微升的氨苄抗性溶液。通过这些简单的步骤,您可以有效地保藏和复苏珍贵的菌种,从而为后续的生物医学研究奠定坚实的基础。
在这一过程中,选择适合的产品与技术可帮助提升保藏效率,ag尊龙凯时提供的相关设备与技术,无疑将是您生物医学研究中的得力助手。
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